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技術文章
影響ELISA試驗效果常見問題原因分析及解決辦法
2013
6-19ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給同行帶來一些啟發，提高試驗質量。操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標本分離不好即進行加樣；2.手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長（特別是...+ -
技術文章
實驗采血要點
2013
6-19材料與試劑1．抗凝劑（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其鈉鹽或鉀鹽，它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶，進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml，市售肝素多為100U~126U／mg。（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一種螯合劑。用生理鹽水配制成4％的溶液備用。（3）阿氏液（Alsever液），配方如下：枸櫞酸鈉（Na3C6H5O7·5H2O）0.80g枸櫞酸0.0325g葡萄糖2.05g氯化鈉0.42gH2O加至100.00ml...+ -
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血細胞分離原理
2013
6-19在體外進行細胞免疫檢測時，首先必須進行淋巴細胞的分離。分離淋巴細胞的方法很多，但不管采用哪種方法，均要求分離的淋巴細胞純度高、產量多，而且不喪失活性，同時也要求分離技術簡單、操作方便。外周血液中紅細胞和白細胞的比例在幾百甚至上千比一，兩類細胞的大小和密度不同，其沉降速度也就不同。紅細胞的自然沉降率較快，加入高分子量的聚合物，如明膠、右旋糖酐等還可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度離心法或二者結合，可以將淋巴細胞從血液中分離出來。這種分離出的淋巴細胞一般包括單核細胞。除去單...+ -
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ELI-SPOT 及其應用
2013
6-19一、原理ELI-SPOT，即斑點ELISA，是利用酶標板作反應容器進行的酶聯免疫反應。其基本原理與ELISA相同。首先用捕獲抗體包被反應板，封閉后，依次加入待檢標本、生物素化檢測抗體、鏈霉菌抗生物素蛋白-堿性磷酸酶及底物，陽性結果出現斑點顯色，利用倒置顯微鏡進行斑點計數。其優勢在于可在與體內（活體條件）極接近的條件下，在體外對細胞分泌成分（如細胞因子、Fas等）進行追蹤研究。幾點說明：l反應板：ELI-SPOT所用的反應板可以是PVDF膜包被好的，也可以是普通酶標板。如用普通...+ -
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細胞內鈣離子PH值和其它離子的動態分析
2013
6-19細胞內鈣離子PH值和其它離子的動態分析通過Indo-1、Fluo-2、Fluo-3、Calciumgreen、SNARF等多種熒光探針，可對細胞內鈣離子、鈉離子及PH值等作熒光標記并對它們進行比率值和濃度梯度變化測定。由于細胞內鈣離子為傳遞信息的第二信使，對細胞生長分化起著重要作用，通過單標記或雙標記對細胞內鈣離子和其它離子的熒光強度和分布測定，測定樣品達到毫秒級的快速變化。借助光學切片功能可以測量樣品深層的熒光分布以及細胞光學切片的生物化學特性的變化。通過不同時間段的檢測可...+ -
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重組人的載脂蛋白E2 ApoE2
2013
6-19Synonyms:ApolipoproteinE2Description:ApoEbelongstoagroupofproteinsthatbindreversiblywithlipoproteinａndplayanimportantroleinlipidmetabolism.Inadditiontofacilitatingsolublizationoflipids,theseproteinshelptomaintainthestructuralintegrityoflipo...+ -
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脂聯素和肥胖的關系
2013
6-18脂聯素的概念Adiponectin（脂聯素）是脂肪細胞分泌的一種內源性生物活性多肽或蛋白質.人體內的Adiponectin（脂聯素）由244個氨基酸組成,分子量為30KD.Adiponectin（脂聯素作為一種胰島素增敏激素（AnInsulin-sensitizingHormone）,可以增加促進骨骼肌細胞的脂肪酸氧化和糖吸收,明顯加強胰島素的糖元異生作用,抑制肝臟的糖生成,是機體的脂質代謝和血糖穩態的調控網絡中的重要調節因子.日本學者近來證明Adiponectin（脂聯素）...+ -
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人腫瘤壞死因子（TNFα elisa kit）酶聯免疫法定量檢測試劑盒
2013
6-18人腫瘤壞死因子酶聯免疫法定量檢測試劑盒HumanTNF-aELISAKit產品描述：腫瘤壞死因子（TNF）是一種具有廣泛生物學活性的細胞因子，主要由激活的單核-巨噬細胞所分泌，參與機體的免疫調節與炎癥反應，也是某些感染性疾病和肝臟損傷的致病因素。正常人體液中的TNF水平一般在100pg/ml以下，當患有某些疾病時，TNF水平可有不同程度增高。因此，檢測患者體液中的TNF水平，具有一定的臨床意義。本試劑盒采用雙抗夾心酶聯免疫檢測法測定人血漿或血清中的TNF，包被抗體及檢測抗體采...+ -
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血漿脂聯素和腫瘤壞死因子-α在2 型糖尿病中
2013
6-18血漿脂聯素和腫瘤壞死因子-α在2型糖尿病中的作用及相關性柳江燕，陳雪紅，胡金貴，王正江，馬冬梅，魯秀娟柳江燕730030蘭州大學第二醫院核醫學科；陳雪紅730030蘭州大學第二醫院核醫學科；胡金貴730030蘭州大學第二醫院核醫學科；王正江730030蘭州大學第二醫院核醫學科；馬冬梅730030蘭州大學第二醫院核醫學科；魯秀娟730030蘭州大學第二醫院核醫學科通訊作者：柳江燕730030蘭州大學第二醫院核醫學科【摘要】目的探討血漿脂聯素（adiponectin）和腫瘤壞死因...+ -
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甲基強的松龍對嗅鞘細胞移植治療受損視網膜神經節細胞的
2013
6-18甲基強的松龍對嗅鞘細胞移植治療受損視網膜神經節細胞的早期保護效應裴群羽，許媛媛，王珂，楊立元，楊磊，雷季良北京大學醫學部解剖學教研室，北京市100083裴群羽★，女，1980年生，黑龍江省哈爾濱市人，漢族，北京大學醫學部在讀碩士，主要從事中樞神經再生方面研究。Hxz800829通訊作者：雷季良,副教授，北京大學醫學部解剖學教研室，北京市100083leijiliang中圖分類號:R617文獻標識碼:A文章編號:1673-8225（2007）29-05701-04收稿日期：20...+ -
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表皮生長因子EGF與胚胎發育和著床
2013
6-18國外醫學計劃生育分冊2000年2月第19卷第1期重慶醫科大學附屬第二醫院婦產科（400046）審校摘要胚胎著床過程的調節十分復雜，近年來細胞生長因子參與胚胎發育和著床的功能研究十分熱門，在細胞生長因子發揮作用的網絡中，表皮生長因子起著舉足輕重的作用，是著床過程順利完成*的因子之一。本文就表皮生長因子改善胚胎發育、啟動胚胎著床、調節植入過程等內容進行簡要綜述。關鍵詞：表皮生長因子胚胎發育著床自1962年Cohen從雄鼠頜下腺分離提純出表皮生長因子（epidermalgrowth...+ -
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ELISA的操作要點
2013
6-18的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應用，兩者均有詳細的使用說明，嚴格遵照規定操作，必能得出準確的結果。4.1標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標...+
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