国产精品久久久久久妇女丨欧美精品高清在线观看丨丰满肥臀大屁股熟妇激情视频丨中文字幕无线观看中文字幕丨丰满少妇夜夜爽爽高潮水

18611095289

article

技術(shù)文章

當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章如何選擇同型對(duì)照?

如何選擇同型對(duì)照?

更新時(shí)間:2015-04-15點(diǎn)擊次數(shù):2763

同型對(duì)照的主要目的是確定一抗的結(jié)合是特異性的,而不是非特異性的Fc受體或與其他蛋白的相互作用。還可以用來(lái)競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合抗體,與功能阻斷抗體發(fā)揮同樣的功能。 同型對(duì)照要與一抗的來(lái)源,Ig分型和標(biāo)記*一致。 

同型對(duì)照(Isotype Control):使用與一抗相同種屬來(lái)源、相同亞型、相同劑量和相同的免疫球蛋白及亞型的免疫球蛋白,用于消除由于抗體非特異性結(jié)合到細(xì)胞表面而產(chǎn)生的背景染色。如果一抗是多抗,可以用與一抗相同的正常血清。同型對(duì)照為免疫熒光標(biāo)記中的陰性對(duì)照。由于熒光標(biāo)記單抗的組來(lái)源不同,應(yīng)選用相同來(lái)源的未標(biāo)記單抗作為同型對(duì)照來(lái)調(diào)整背景染色。舉個(gè)例子:比如檢測(cè)一抗為單抗的mouse anti rat CD11b,clone OX-42 purified IgG,那么它的isotype 是mouse IgG2a, 所以可以用純化的 mouse IgG2a來(lái)做OX-42的同型對(duì)照(Isotype Control)。此外,同型對(duì)照與單克隆抗體(MoAb)所標(biāo)記的熒光色素、濃度、F:P比值(標(biāo)記的熒光色素與免疫球蛋白分子的比值)應(yīng)該相同為*,這對(duì)準(zhǔn)確設(shè)定陰性與陽(yáng)性細(xì)胞的界標(biāo)有重要意義,切忌使用與MoAb不相 匹配的同型對(duì)照,為同一實(shí)驗(yàn)室、采用相同工藝或方法制備(如同一品牌)的產(chǎn)品。

如何選擇同型對(duì)照 ?

(1)一般選擇與一抗的成分*相同種屬來(lái)源、相同亞型和亞鏈、相同熒光標(biāo)記的抗體,比如抗人的CD56 FITC標(biāo)記的抗體,成份是Mouse IgG1,κ。那么它的同型對(duì)照應(yīng)該是FITC標(biāo)記的Mouse IgG1,κ。注意同型對(duì)照的成份跟它的名稱(chēng)是相同的. 

(2)如果是抗體的組合形式是純化的一抗+熒光標(biāo)記的二抗,那么應(yīng)該選擇一抗的同型對(duì)照。比如CD86的純化抗體,成分是Mouse IgG1,κ。它的同型對(duì)照是純化的Mouse IgG1,κ。它的二抗PE標(biāo)記的抗小鼠IgG1,。那么染色方式如下:樣本管:純化的CD86+PE標(biāo)記的抗Mouse IgG1(二抗)+樣本,同型對(duì)照管:純化的同型對(duì)照+PE標(biāo)記的抗Mouse IgG1(二抗 )+樣本. 

(3)如果沒(méi)有找到適合的同型對(duì)照,在保持來(lái)源相同、熒光標(biāo)記相同、免疫球蛋白類(lèi)別相同條件下,那么優(yōu)先選擇的順序應(yīng)該是亞鏈不同--亞型不同--相同類(lèi)別。比如,某種的抗體的來(lái)源是Mouse IgG2b,κ。如果在同型對(duì)照表里面找不到*相同的同型對(duì)照,那么優(yōu)先選擇相同熒光標(biāo)記Mouse IgG2a為同型對(duì)照。如果也沒(méi)有找到Mouse IgG2a,那么優(yōu)先選擇相同熒光標(biāo)記的Mouse IgG2b作為同型對(duì)照。如果zui后還是沒(méi)有找到Mouse IgG2b,那么選者相同熒光標(biāo)記的Mouse IgG2作為同型對(duì)照。


服務(wù)熱線(xiàn)
18611095289

掃碼加微信

主站蜘蛛池模板: 国产高清女同学巨大乳在线观看| 精品无码久久久久久久久| 亚洲成av人在线视猫咪| 夜夜添无码试看一区二区三区| 久久精品无码av| 97se亚洲精品一区| 最新高清中文字幕免费mv| 97无码免费人妻超级碰碰碰碰| 久久亚洲精品中文字幕无码| 天天色影网| 亚洲成a×人片在线观看| h无码精品3d动漫在线观看| 久久婷婷香蕉热狠狠综合| 激情欧美日韩一区二区| 亚洲国产成av人天堂无码 | 国产蜜臀av在线一区尤物| 久青草国产97香蕉在线影院 | 亚洲人成图片小说网站| 在厨房拨开内裤进入毛片| 无套熟女av呻吟在线观看| 人妻少妇无码专视频在线| 亚洲乱码av中文一区二区| 成人精品一区二区三区中文字幕| 麻豆成人久久精品二区三区免费 | 国产原创av中文在线观看| 99久久99久久免费精品蜜桃 | 无人区一线二线三线乱码| 欧美多毛肥胖老妇做爰| 免费的很黄很污的视频| 中国内射xxxx6981少妇| 顶级少妇做爰视频在线观看| 久久精品噜噜噜成人| 伊人久久久av老熟妇色| 久久精品99久久香蕉国产| 朝鲜美女黑毛bbw| 大肉大捧一进一出视频出来呀| 婷婷综合缴情亚洲| 一本色道久久综合亚洲精品| 国产毛片精品av一区二区| 久天啪天天久久99久孕妇| 国产精品欧美亚洲韩国日本久久|